广州中医药大学52.7分新研究:鸦胆子素 A 靶向稳定 NR4A1,为系膜增生性肾小球肾炎治疗开辟新路径

该研究遵循 “临床现象→机制探索→药物筛选→验证转化” 的逻辑链条，分四步层层递进：

NR4A1 是 MsPGN 的关键调控靶点

• 临床样本分析显示，IgAN（MsPGN 最常见类型）患者肾组织中 NR4A1 mRNA 和蛋白水平显著降低，且与肾小球滤过率呈正相关。
• 细胞实验中，敲低 NR4A1 会促进 LPS/PDGF-BB 诱导的系膜细胞增殖，上调 NF-κB 磷酸化水平及 IL-6、CCL2 等炎症因子表达；过表达 NR4A1 则可抑制上述效应。
• 动物实验中，AAV9 介导的 NR4A1 过表达可降低大鼠尿白蛋白 / 肌酐比值，减轻系膜细胞增殖和基质沉积，改善肾脏病理损伤。

• 分子对接结果显示，BA 与 NR4A1 配体结合域的 D481/Q568 位点形成 4 个氢键，结合亲和力达 - 8.00 kcal/mol，与已知 NR4A1 激动剂 CsnB 结合位点一致。
• MST、SPR 实验证实，BA 与野生型 NR4A1 的解离常数（Kd）分别为 12.42 μM 和 3.62×10⁻⁵ M，而 D481A/Q568A 突变会显著降低结合亲和力。

• 体外实验中，BA 以剂量依赖方式抑制系膜细胞增殖，阻滞细胞周期于 G0/G1 期，下调炎症因子和纤维化相关基因表达。
• 体内实验中，BA 可显著降低抗 Thy1 肾炎大鼠的 24 小时尿蛋白量，减轻肾小球肥大和系膜基质沉积；在 NR4A1 敲除大鼠中，BA 的治疗效果完全消失。
• 对比实验显示，BA 的疗效优于 CsnB，且与 CsnB 联用存在竞争关系，提示 BA 是更优的 NR4A1 调控剂。

• CHX 追踪实验证实，BA 可延长 NR4A1 的蛋白半衰期，且该效应可被蛋白酶体抑制剂 MG132 模拟，说明 BA 靶向泛素 - 蛋白酶体通路。
• 泛素化实验显示，BA 选择性抑制 NR4A1 的 K48 位多聚泛素化，对 K63 位泛素化无影响；点突变实验证实，NR4A1 的 K558 位点是关键泛素化位点，该位点突变会完全阻断 BA 的稳定作用。
• 机制上，稳定的 NR4A1 可自激活自身启动子，增强对 NF-κB 信号的转录抑制，最终抑制炎症级联反应和系膜细胞增殖。

该研究发现，化合物 B8A 能够通过靶向调控 NRAI 的表达与小胶质细胞的活化，显著降低狼疮肾炎模型小鼠的尿蛋白水平，抑制肾脏组织中炎症因子的释放，从而减轻肾脏的病理损伤。这一结果不仅验证了 B8A 在狼疮肾炎中的治疗潜力，也进一步阐明了 NRAI - 小胶质细胞轴在疾病进展中的关键作用，为狼疮肾炎的干预提供了新的候选药物和作用靶点。

该研究证实，B8A 在体外能够通过靶向 NRAI 并抑制 NF-κB 通路的活化，直接抑制小胶质细胞的增殖和炎症因子的释放，从而发挥其抗炎和抗增殖作用。这一结果从细胞层面验证了 B8A 的作用机制，进一步支持了其作为狼疮肾炎潜在治疗药物的价值。

该研究揭示了 RA 在狼疮肾炎中的促病机制：它通过抑制 NRAI 的 K48 连接多聚泛素化与蛋白酶体降解，从而稳定 NRAI 蛋白，激活其下游炎症与增殖通路，并通过 NF-κB 的正反馈环路进一步放大炎症反应，最终加重肾脏损伤。这一发现不仅阐明了 RA 与 NRAI 在疾病中的相互作用，也为狼疮肾炎提供了从泛素化调控角度出发的新干预思路。